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产品介绍:
NRPB58——Ni-TED NUPharose FF Ni-TED NUPharose FF是金属离子脱落率较低的一款金属螯合亲和填料,配基为三羧甲基乙二胺(tris-carboxymethyl ethylene diamine,TED)基团,配位金属离子为Ni2+。
本产品的TED配基与Ni2+形成的五配位结构稳定性好,对螯合剂、还原剂、酸、碱等试剂有着出色的耐受性,可在10mM EDTA、100 mM β-ME或50 mM DTT等条件下正常使用,可在pH=1或pH=14的条件下处理24h后保持出色的色谱性能,也长期保存在10mM NaOH 中,洗脱液中需要的咪唑浓度相对其他金属螯合填料更低。因此,Ni-TED NUPharose FF适合用于下列纯化体系:
目标蛋白中含半胱an酸或者对氧敏感,需要添加 β-ME 或 DTT 时;
目标蛋白中含半胱an酸且有金属反应性,需要添加 DTT 和 EDTA 时
目标蛋白容易被金属蛋白酶水解,需要添加 EDTA 时;
目标蛋白对高浓度咪唑敏感,需要降低洗脱液中咪唑浓度时;
真核细胞表达体系中本身含 β-ME 或 EDTA 的情况;
对产物中金属离子含量要求严格时。
Ni-TED NUPharoseFF的配基偶联工艺经过了特殊的设计,使得成品的压力/流速特性得到大幅提升,最大流速和耐压分别超过1500cm/h和0.5MPa。通过配基修饰过程的优化,本产品在亲和力(载量)和特异性(选择性)之间取得良好的均衡:对带组an酸标签蛋白的结合量大于20 mg/mL的同时,一步纯化后样品纯度可达90%以上。
产品特点与技术指标:
产品名称 | 三羧甲基乙二胺-琼脂糖 |
基质 | 6%交联琼脂糖 |
配基 a | 三羧甲基乙二胺,螯合~60 μmol Ni2+/mL |
粒径范围 b | 45~165 μm |
平均粒径 | ~90 μm |
动态结合载量 c | ≥20 mg/mL 带组-氨-酸标签蛋白 |
推荐工作流速 d | 60~300 cm/h |
最大流速与压力 e | >1500 cm/h ,0.5 MPa |
使用 pH | 3~12(推荐的工作 pH),3~12(长期稳定);2~14(短期稳定) |
化学稳定性 | 1)纯化缓冲液:常用的水相缓冲液,可含有 10 mM EDTA ,100 mM β-ME 或 50 mM DTT。 2)在位清洗(CIP)处理:1 M NaOH 、1~2 M NaCl 、70%乙醇、 30%异丙醇,0.1~0.5%非离子型表面活性剂。 3)在下述溶液中处理特定时间,填料性能保持稳定:10 mM NaOH (长期)、0.1 M 盐酸(24 h)、6 M 盐酸胍(24 h)。 |
储存与运输 | 20%乙醇,2~30 ℃ |
南京亿迅生物科技有限公司出品的各种蛋白类产品,产品质量稳定,价格实惠,在国内各科研院所和高校拥有良好的品誉。
该类产品还有:琼脂糖微球-重组耐碱蛋白A亲和填料,含亚氨基二乙酸-琼脂糖,次氮基三乙酸-琼脂糖,次氮基三乙酸-交联琼脂糖,4%交联琼脂糖-重组耐碱蛋白A 亲和填料等。
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三羧甲基乙二胺-琼脂糖