ACK红细胞裂解液主要由氯化铵(NH4Cl)、碳酸氢钾(KHCO3)和磷酸二氢钠(NaH2PO4)等成分组成。其工作原理是通过低渗溶液破坏红细胞膜的结构,使细胞内的水分迅速进入细胞内,导致细胞膨胀并最终破裂。同时,氯化铵能够改变细胞膜的通透性,加速红细胞的溶解过程。
ACK红细胞裂解液的特点:
1.高效快速:能够在短时间内有效地裂解红细胞,通常在几分钟内即可完成。
2.温和稳定:对其他细胞类型的影响较小,不会对白细胞造成明显的损伤。
3.操作简便:使用红细胞裂解液进行红细胞裂解操作简单,无需复杂的设备和步骤。
4.成本低廉:价格相对较低,适合大规模实验和生产应用。
使用方法:
1.采集血液样本:从患者或志愿者处采集适量的血液样本,通常使用抗凝剂防止血液凝固。
2.离心分离:将血液样本进行离心分离,得到红细胞沉淀和血浆上清液。
3.加入红细胞裂解液:向红细胞沉淀中加入适量的红细胞裂解液,轻轻混匀。
4.孵育:将混合液置于室温下孵育一定时间,通常为几分钟至十几分钟不等。
5.离心洗涤:再次进行离心分离,弃去上清液,用PBS或其他缓冲液洗涤沉淀物。
6.收集细胞:将洗涤后的沉淀物重悬于适当的培养基中,即可得到去除红细胞的细胞悬液。
ACK红细胞裂解液的优势:
1.提高实验效率:能够快速有效地去除红细胞,缩短实验周期,提高实验效率。
2.减少污染风险:由于对其他细胞类型的影响较小,可以降低实验过程中的污染风险。
3.适用范围广:适用于多种类型的血液样本处理,如全血、骨髓等。
4.易于储存和使用:通常以液体形式提供,易于储存和使用,无需特殊设备。